根据笔者多年相关研究经验,选择应用较多的植物基因工程实验27个汇编成书。包含植物基因克隆,植物的组织培养与遗传转化及分子检测和植物基因的分子遗传与生化研究三个专题部分;这些专题包括了从事相关专业的主要研究背景,原理和研究方法。本书可应用于植物分子生物学专业课程,还可应用于相关专业交叉学科。希望能够让相关领域的本科生、研究生和青年科研人员快速了解相关实验原理,并掌握相关实验操作。希望能够让相关领域的本科生、研究生和青年科研人员快速了解相关实验原理,并掌握相关实验操作。
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目录
丛书序
本书序
第一部分 植物基因克隆(1)
实验一植物叶片基因组的提取方法(2)
实验二植物叶片总RNA的提取与cDNA的合成方法(3)
实验三聚合酶链反应(6)
实验四CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞DH5α的方法(11)
实验五Inoue法制备大肠杆菌超级感受态的方法(13)
实验六大肠杆菌DH5α的转化方法(15)
实验七植物基因的扩增与基于T载体连接的克隆方法(17)
实验八大肠杆菌质粒的提取方法(22)
实验九农杆菌感受态细胞GV3101和EHA105的制备方法(25)
实验十农杆菌GV3101和EHA105转化方法(27)
第二部分 植物的组织培养与遗传转化及分子检测(30)
实验十一拟南芥的栽培方法(31)
实验十二拟南芥的无菌组织培养方法(34)
实验十三农杆菌GV3101介导的拟南芥遗传转化方法(37)
实验十四拟南芥转基因植株的筛选与PCR鉴定方法(38)
实验十五水稻愈伤组织的培养与农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化方法(42)
实验十六水稻转基因植株的筛选与PCR鉴定方法(46)
实验十七实时荧光定量PCR(49)
第三部分 植物基因的分子遗传与生化研究(54)
实验十八报告基因的融合表达方法(54)
实验十九十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(60)
实验二十植物总蛋白的双向电泳方法(64)
实验二十一原核表达系统中蛋白质的诱导表达与纯化方法(70)
实验二十二甲醇酵母表达系统中蛋白质的诱导表达与纯化方法(76)
实验二十三酵母双杂交(81)
实验二十四Westernblot方法(86)
实验二十五免疫沉淀方法(90)
实验二十六植物叶肉原生质体的提取与质粒的瞬时转化方法(92)
实验二十七基因枪介导的洋葱表皮细胞的瞬时转化方法(94)
主要参考文献(97)
名词索引(中英文对照)(98)