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生物化学实验 读者对象:生物学科相关专业的本科生、研究生
本书内容分为三大部分:第1部分系统介绍了生物化学实验基本原理及方法,包括生物分子分离纯化、分光光度技术、层析技术、电泳技术、离心技术和分子生物学技术基础;第2部分为基础性实验,主要是生物化学的经典实验,包括蛋白质、酶、维生素、核酸、糖和脂肪的分离和测定,共计30个实验项目,旨在强化生物化学基础实验技能,可操作性强;第3部分为7个综合性实验,每个实验项目涉及两个或两个以上的技术,目的在于培养学生的综合实验能力。第1部分的生物化学实验基础理论,在后两个部分中得到了切实应用和充分体现。
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何开跃编著的《生物化学实验(双语十二五江苏省高等学校重点教材)》系统介绍了生物化学实验基本原理及方法,《生物化学实验(双语十二五江苏省高等学校重点教材)》除了附录外,三个部分全部为中英文对照,可作为综合性大学及农林院校生物学科相关专业的本科生、研究生及外国留学生的生物化学实验课教材,适合相关任课教师和研究人员使用和参考。
第l部分 生物化学实验基本原理与方法 Part l Basic Principles and Methodologies of BiochemicalExperiments I生物大分子的分离与纯化的一般步骤与方法 I General Procedures and Methods for Isolation andPurification of Biomacromolecules 11分光光度法 II Spectrophotometry III层析 III Chromatography IV电泳 ⅣElectr叩hOresis V离心 V Centrifugation V1分子生物学技术基础——聚合酶链式反应(PcR) 前言 第l部分 生物化学实验基本原理与方法 Part l Basic Principles and Methodologies of BiochemicalExperiments I生物大分子的分离与纯化的一般步骤与方法 I General Procedures and Methods for Isolation andPurification of Biomacromolecules 11分光光度法 II Spectrophotometry III层析 III Chromatography IV电泳 ⅣElectr叩hOresis V离心 V Centrifugation V1分子生物学技术基础——聚合酶链式反应(PcR) VI Brief Introduction to Basic Technique of MolecularBiologyPolymerase Chain Reaction(PCR、 第2部分 基础性实验 Part 2 Basic Experiments 实验1蛋白质和氨基酸的呈色反应 Experiment l Color Reactions of Proteins and AminoAcids 实验2蛋白质的沉淀与变性 Experiment 2 Precipitation and DenaturationofProteins 实验3微量凯氏定氮法测蛋白质总氮含量 Experiment 3 Quantification of Crude Proteins—Kieldahl’SNitrogen Determination 实验4双缩脲法测定蛋白质含量 Experiment 4 Quantification ofProteins—Biulet Method 实验5 Folin一酚试剂法测定蛋白质含量 Experiment 5 Quantification ofProteins———Folin—LowryMethod 实验6紫外吸收法测定蛋白质含量 Experiment 6 Quantification ofProteins by UltravioletAbsorption 实验7染料结合法测定蛋白质含量 Experiment 7 Quantification ofProteins by Dye—bindingMethod 实验8几种重要氨基酸(赖氨酸、色氨酸和脯氨酸)的含量测定 Experiment 8 Determination of the Contents of SomeImportant Amino Acids (LysTrp and Pro) 实验9血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 Experiment 9 Cellulose Acetate Membrane Electrophoresisof Serum Proteins 实验10酪蛋白的制备 Experiment 10 Preparation ofCasein 实验11 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)~IJ定蛋白质分子质量 Experiment 11 Molecular Weight Determination ofProteinsby SDSPAGE 实验12聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦测定蛋白质等电点 Experiment 12 pI Determination of Proteins byPolyacrylamide Gel Isoelectrofocusing 实验13酶的特性 Experiment 13 Properties ofEnzymes 实验14多酚氧化酶米氏常数(‰)的测定 Experiment 14 Determination of Michaelis Constant(Kin)ofPolyphenol Oxidase 实验1 5核酸酶的活力测定 Experiment 15 Activity Assay ofNucleases 实验16谷丙转氨酶活力测定 Experiment 16 Determination ofActivity ofGlutamate—Pyruvate Transaminase 实验l 7植物抗氧化酶类(超氧物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶)活 性测定 Experiment 17 Activity Assay of Common AntioxidantEnzymes(SOD,POD and CAT)In Plant 实验1 8乳酸脱氢酶(LDH)活性测定 Experiment 18 Activity Assay ofLactateDehydrogenase(LDH) 实验19维生素C的定量测定——2,6二氯酚靛酚法 Experiment 19 Quantification ofVitamin C by2,6Dichlorophenolindo Phenol Method 实验20花菜中核酸的分离和鉴定 Experiment 20 Extraction and Identification ofNucleicAcids From Cauliflower 实验21酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 Experiment 21 Extraction ofYeast RNA and IdentificationOf Its Components 实验22定磷法测定核酸含量 Experiment 22 Quantification of Nucleic Acids by Methodof Phosphate Determination 实验23定糖法测定RNA含量 Experiment 23 Quantification of RNA by RiboseDetermination Method 实验24二苯胺法测定DNA含量 Experiment 24 Quantification of DNA by DiphenylamineMethod 实验25紫外吸收法测定核酸含量 Experiment 25 Quantification ofNucleic Acids byUltraviolet Absorption Method 实验26醋酸纤维薄膜电泳分离核糖核苷酸 Experiment 26 Separation of Ribonucleotides by CelluloseAcetate Membrane Electrophoresis 实验27 还原糖和总糖的含量测定_DNs法 Experiment 27 Determination of Reducing Sugar and TotalSugar by DNS Method 实验28血糖的定量测定——葡萄糖氧化酶氨基安替比林(COD—PAP) Experiment 28 Quantification of Blood Glucose by GlucoseOxidase4 Aminoantipyrine(GOD—PAP) 实验29粗脂肪的提取和测定 Experiment 29 Extraction and Quantitative DeterminationofCrude Fat 实验30 油脂的化学性质 Experiment 30 Chemical Properties ofOil or Fat 第3部分 综合性实验 Part 3 Comprehensive Experiments 实验3l蛋白质的酸水解及其氨基酸的纸层析鉴定 Experiment 3 1 Acid Hydrolysis of Proteins andIsolation and Identification ofAmino Acids by Paper Chromatography 实验32离子交换层析分离混合氨基酸 Experiment 32 Separating Mixed Amino Acids byIon—exchange Chromatography 实验33血清球蛋白的盐析分离及分子筛凝胶层析法脱盐 Experiment 33 Saltingout Separation of SerumGlobulins and Desalting by Molecular Sieving Gel Chromatography 实验34糖的测定和鉴定——蒽酮试剂和纸层析法 Experiment 34 Quantification and Identification ofSaccharides by Anthrone Colorimetry and Paper Chromatography 实验35聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 Experiment 35 Separating LDH Isoenzymes by PAGE 实验36叶绿体的制备及相关分析 Experiment 36 Preparation and Anabrses ofChloroplasts 实验37植物分子生物学系列实验 Experiment 37 Series Experiments ofPlant MolecularBiology 参考文献 附录 附录1 基础生物化学实验室常用仪器简介 附录2 常用缓冲溶液的配制
目录
前言 第1 部分 生物化学实验基本原理与方法 1 Part 1 Basic Principles and Methodologies of Biochemical Experiments 3 I 生物大分子的分离与纯化的一般步骤与方法 5 I General Procedures and Methods for Isolation and Purification of Biomacromolecules 13 II 分光光度法 25 II Spectrophotometry 28 III 层析 33 III Chromatography 38 IV 电泳 44 Ⅳ Electrophoresis 49 V 离心 55 V Centrifugation 58 VI 分子生物学技术基础——聚合酶链式反应(PCR) 61 VI Brief Introduction to Basic Technique of Molecular Biology—Polymerase Chain Reaction (PCR) 66 第2 部分 基础性实验 75 Part 2 Basic Experiments 75 实验1 蛋白质和氨基酸的呈色反应 77 Experiment 1 Color Reactions of Proteins and Amino Acids 82 实验2 蛋白质的沉淀与变性 87 Experiment 2 Precipitation and Denaturation of Proteins 92 实验3 微量凯氏定氮法测蛋白质总氮含量 97 Experiment 3 Quantification of Crude Proteins—Kjeldahl’s Nitrogen Determination 101 实验4 双缩脲法测定蛋白质含量 106 Experiment 4 Quantification of Proteins—Biuret Method 108 实验5 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量 110 Experiment 5 Quantification of Proteins — Folin-Lowry Method 113 实验6 紫外吸收法测定蛋白质含量 115 Experiment 6 Quantification of Proteins by Ultraviolet Absorption 117 实验7 染料结合法测定蛋白质含量 119 Experiment 7 Quantification of Proteins by Dye-binding Method 122 实验8 几种重要氨基酸(赖氨酸?色氨酸和脯氨酸)的含量测定 124 Experiment 8 Determination of the Contents of Some Important Amino Acids (Lys, Trp and Pro) 129 实验9 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 135 Experiment 9 Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis of Serum Proteins 138 实验10 酪蛋白的制备 141 Experiment 10 Preparation of Casein 143 实验11 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子质量 145 Experiment 11 Molecular Weight Determination of Proteins by SDS-PAGE 151 实验12 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦测定蛋白质等电点 158 Experiment 12 pI Determination of Proteins by Polyacrylamide Gel Isoelectrofocusing 161 实验13 酶的特性 165 Experiment 13 Properties of Enzymes 170 实验14 多酚氧化酶米氏常数(Km)的测定 176 Experiment 14 Determination of Michaelis Constant (Km) of Polyphenol Oxidase 179 实验15 核酸酶的活力测定 182 Experiment 15 Activity Assay of Nucleases 184 实验16 谷丙转氨酶活力测定 187 Experiment 16 Determination of Activity of Glutamate-Pyruvate Transaminase 189 实验17 植物抗氧化酶类(超氧物歧化酶?过氧化物酶和过氧化氢酶)活性测定 193 Experiment 17 Activity Assay of Common Antioxidant Enzymes (SOD, POD and CAT) In Plant 198 实验18 乳酸脱氢酶(LDH)活性测定 205 Experiment 18 Activity Assay of Lactate Dehydrogenase (LDH) 208 实验19 维生素C 的定量测定——2,6-二氯酚靛酚法 211 Experiment 19 Quantification of Vitamin C by 2, 6-Dichlorophenolindo Phenol Method 214 实验20 花菜中核酸的分离和鉴定 218 Experiment 20 Extraction and Identification of Nucleic Acids From Cauliflower 221 实验21 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定 225 Experiment 21 Extraction of Yeast RNA and Identification of Its Components 227 实验22 定磷法测定核酸含量 230 Experiment 22 Quantification of Nucleic Acids by Method of Phosphate Determination 233 实验23 定糖法测定RNA 含量 236 Experiment 23 Quantification of RNA by Ribose Determination Method 238 实验24 二苯胺法测定DNA 含量 241 Experiment 24 Quantification of DNA by Diphenylamine Method 243 实验25 紫外吸收法测定核酸含量 245 Experiment 25 Quantification of Nucleic Acids by Ultraviolet Absorption Method 247 实验26 醋酸纤维薄膜电泳分离核糖核苷酸 249 Experiment 26 Separation of Ribonucleotides by Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis 251 实验27 还原糖和总糖的含量测定——DNS 法 253 Experiment 27 Determination of Reducing Sugar and Total Sugar by DNS Method 256 实验28 血糖的定量测定——葡萄糖氧化酶-氨基安替比林(GOD-PAP)法 259 Experiment 28 Quantification of Blood Glucose by Glucose Oxidase-4-Aminoantipyrine (GOD-PAP) 261 实验29 粗脂肪的提取和测定 263 Experiment 29 Extraction and Quantitative Determination of Crude Fat 265 实验30 油脂的化学性质 267 Experiment 30 Chemical Properties of Oil or Fat 273 第3 部分 综合性实验 281 Part 3 Comprehensive Experiments 281 实验31 蛋白质的酸水解及其氨基酸的纸层析鉴定 283 Experiment 3 Acid Hydrolysis of Proteins and Isolation and Identification of Amino Acids by Paper Chromatography 285 实验32 离子交换层析分离混合氨基酸 288 Experiment 32 Separating Mixed Amino Acids by Ion-exchange Chromatography 291 实验33 血清球蛋白的盐析分离及分子筛凝胶层析法脱盐 294 Experiment 33 Salting-out Separation of Serum Globulins and Desalting by Molecular Sieving Gel Chromatography 297 实验34 糖的测定和鉴定——蒽酮试剂和纸层析法 301 Experiment 34 Quantification and Identification of Saccharides by Anthrone Colorimetry and Paper Chromatography 304 实验35 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 307 Experiment 35 Separating LDH Isoenzymes by PAGE 312 实验36 叶绿体的制备及相关分析 318 Experiment 36 Preparation and Analyses of Chloroplasts 325 实验37 植物分子生物学系列实验 334 Experiment 37 Series Experiments of Plant Molecular Biology 352 参考文献 374 附录 375 附录1 基础生物化学实验室常用仪器简介 377 附录2 常用缓冲溶液的配制 385
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