本书共分为七个部分，包含18章。第一部分专注于“基因分型的引物设计”，包括七章。这一部分深入探讨了基于PCR技术的基因分型和遗传多样性研究，涉及的主题包括植物物种分析、秀丽隐杆线虫的基因分型、等位基因特异性扩增、海洋物种遗传多样性检测、风疹病毒检测、基于SNP的动物物种检测，以及用于突变和多态性检测的扩增抑制突变系统PCR。第二部分“特定区域全基因组鉴定的引物设计”，包含两章，专门讨论如何设计引物以识别核酸中的特定序列，特别是环形DNA和富AT区域。第三部分讨论了多重PCR的引物设计，这一技术可以在单一反应中扩增多个DNA目标。这部分包括两章，分别介绍了多重PCR的引物设计和质粒分类PCR(PlasTax-PCR)的相关协议。第四部分专门讨论“qPCR的引物设计”，总共两章，重点介绍如何使用qPCR技术识别转基因植物中的基因拷贝数，以及如何利用qPrimerDB软件进行qPCR引物的设计。第五部分“植物和动物病毒鉴定的引物设计”，也包含两章，描述了如何设计引物以识别番木瓜伞状病毒(一种植物病毒)和SARS-CoV-2(一种动物病毒)的基因组。第六部分一章，介绍了“引物设计软件的使用”，重点介绍FASTPCR软件的应用。最后，第七部分讨论了“新型PCR方法的引物设计”，涵盖最先进技术的PCR引物设计，包括使用磷酸甲基化寡核苷酸作为引物以及用于法医生物学应用的焦磷酸测序引物设计。