本书系统介绍中西医结合研究领域前沿和常规实验技术,对组织、细胞、蛋白、基因等各层面实验技术与方法予以重点阐述。本书分为四篇,涵盖形态学与动物影像技术、细胞生物学技术、生化与分子生物学技术及蛋白质组学技术,具体包括光镜实验技术、电镜实验技术、激光共聚焦显微镜技术、小动物活体成像技术、细胞培养技术、细胞功能研究、分子生物学技术、生化与免疫学分析技术,以及差异蛋白分析技术与蛋白相互作用研究等内容。
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1993年毕业于第二军医大学临床医学专业,先后于中国人民解放军第86医院、安徽省马鞍山市第二人民医院普外科从事临床外科工作;1999年于福建中医学院病理教研室从事教学工作;2002年赴美留学,2007年获得美国俄克拉荷马大学生化和分子生物学专业博士学位,之后赴新加坡国立大学从事免疫学博士后研究;2009年7月作为"海外高层次引进人才"引进至福建中医药大学;2011-2014年师从国医大师陈可冀院士从事中西医结合博士后研究。2011年起历任福建中医药大学中西医结合研究院副院长、福建中医药大学医学实生化和分子生物学博士,福建中医药大学教授、博士研究生导师,福建省引进高层次创业创新人才专家(百人计划),享受国务院政府特殊津贴。现任福建中医药大学副校长,农工党福建省第十三届委员会副主任委员。
目录
第一篇 形态学与动物影像技术
第一章 光镜实验技术 2
第一节 常规组织制片技术 2
第二节 特殊染色技术 7
第三节 免疫组织化学技术 12
第四节 光镜显微图像采集与计量分析 14
第二章 电镜实验技术 18
第一节 概述 18
第二节 透射电镜常规样品制备 20
第三节 示踪与离子电镜细胞化学 27
第四节 电镜特殊染色 30
第五节 电镜细胞化学 33
第六节 电镜免疫细胞化学 37
第七节 透射电子显微镜、扫描电子显微镜与细胞超微结构图像定量分析 40
第三章 激光共聚焦显微镜技术 48
第一节 免疫荧光技术 48
第二节 激光扫描共聚焦显微镜技术 50
第三节 双光子显微成像技术 57
第四章 小动物活体成像技术 61
第一节 小动物磁共振成像系统 61
第二节 小动物超声(超高分辨率小动物超声多模态成像技术) 71
第三节 小动物活体生物发光/荧光成像系统 75
第四节 小动物micro CT 81
第五节 VECToR+活体小动物SPECT/CT/PET影像系统 89
第二篇 细胞生物学技术
第一章 细胞培养技术 96
第一节 细胞培养 96
第二节 细胞的冻存、复苏与运输 98
第三节 细胞计数 101
第四节 培养细胞的常规观察 105
第五节 常用原代细胞培养及鉴定 107
第二章 细胞功能研究 116
第一节 细胞转染、感染 116
第二节 细胞增殖 121
第三节 细胞凋亡 124
第四节 细胞迁移和侵袭实验技术 129
第五节 自噬、焦亡、内质网应激、衰老检测 133
第六节 流式细胞术分析、分选及其应用 145
第七节 细胞功能高通量筛选 160
第八节 激光共聚焦应用 167
第九节 诱导多能干细胞重编程 179
第十节 类器官培养技术 186
第三篇 生化与分子生物学技术
第一章 分子生物学技术 192
第一节 核酸提取分析 192
第二节 聚合酶链反应 199
第三节 实时荧光定量PCR 202
第四节 数字PCR技术 208
第五节 双荧光素酶报告基因检测 216
第六节 基因克隆 218
第七节 基因编辑技术 225
第八节 转录组测序及其分析 231
第九节 单细胞测序和空间转录组技术 241
第二章 生化与免疫学分析技术 247
第一节 分光光度法 247
第二节 酶联免疫分析 250
第三节 放射免疫分析 255
第四节 血液流变学分析(血液黏度检测) 259
第五节 全自动凝血分析 261
第四篇 蛋白质组学技术
第一章 差异蛋白分析技术 268
第一节 蛋白印迹技术—Western Blot 268
第二节 悬液芯片技术 275
第三节 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法 281
第四节 飞行时间质谱及其联用技术 287
第五节 空间蛋白质组学技术 294
第二章 蛋白相互作用研究 299
第一节 蛋白纯化 299
第二节 蛋白质与蛋白质相互作用 304
第三节 蛋白质与核酸相互作用 307
第四节 蛋白质与小分子相互作用 309
第五节 生物膜干涉在蛋白互作相关技术及其应用 312
参考文献 323