全书分为绪论、实验和附录三部分。绪论部分主要讲述微生物实验课程开设的目的与意义、相关实验记录与报告的规范、实验室规则及安全注意事项、生物安全等内容。实验部分精选了微生物实验的无菌环境和操作,微生物实验的重要仪器,显微镜使用和形态学观察,微生物的培养、分离及生长,微生物遗传学技术,分子生物学技术,微生物检测与鉴定,微生物技术的应用等相关内容,以及典型实验的操作视频。附录内容包括常用染色液的配制、常用培养基配方和常用缓冲液的配制。
本书可供综合性大学、师范、医药和农林院校有关专业的大学本科生使用,也可供微生物实验技术工作者参考。
蔡孟浩,华东理工大学教授,生物反应器工程国家重点实验室PI,入选国家 级青年人才计划(2021)、华东理工大学青年英才校长奖 (2024),上海市青年科技启明星计划A类(2019),华东理工大学青年英才培育计划A类(2019) 等资助。作为项目负责人,主持国家重点研发计划课题、国家自然科学基金项目、国家重大新药创制合作课题、国家863课题、上海科技创新行动计划项目、中央高校基本科研业务费基金、企业横向合作项目20余项,完成多项专利转让。以通讯作者在ScienceAdvances、MetabolicEngineering、JournalofBiologyChemistry、BiotechnologyandBioengineering、AppliedandEnvironmentalMicrobiology、ACSSyntheticBiology等权威期刊发表论文60余篇,申请中国发明专利26项及PCT专利1项,其中授权17项、转让4项,担任10项学术组织委员、5项期刊多类编委及5家企业技术顾问,NatureCatalysis、NatureSynthesis、NatureChemicalBiology、Naturecommunications、CellReports等期刊审稿人。
著作情况 无
绪论?/?1
第一章?微生物实验的无菌环境和操作?/?5
第一节 微生物实验的无菌环境 5
一、无菌室 5
二、超净工作台 6
三、环境无菌检测的方法 8
第二节 微生物实验的无菌操作 14
一、无菌操作前的准备工作 14
二、灭菌和消毒方法 14
第二章?微生物实验的重要仪器?/?22
一、普通光学显微镜 22
二、高压蒸汽灭菌锅 23
三、移液器 24
四、电子天平 25
五、pH计 26
六、分光光度计 27
七、超净工作台 28
八、恒温培养箱 29
九、摇瓶培养设备 29
十、冰箱及超低温冰箱 30
十一、离心机 31
十二、真空冷冻干燥机 32
十三、PCR仪 32
十四、厌氧培养箱 33
十五、生物安全柜 34
十六、电热恒温干燥箱 35
十七、电泳仪 36
十八、电泳凝胶成像仪 37
十九、微量紫外-可见分光光度计 38
二十、超声破碎仪 38
二十一、多功能酶标仪 39
二十二、微生物高通量培养仪 40
二十三、高压均质机 41
二十四、全自动菌落计数仪 41
二十五、扫描电子显微镜 43
第三章?显微镜使用和形态学观察?/?45
实验一 普通光学显微镜的使用 46
实验二 暗视野显微镜的使用 51
实验三 相差显微镜的使用 53
实验四 微分干涉相差显微镜的使用 56
实验五 荧光显微镜的使用 59
实验六 微生物大小的测定 61
实验七 微生物的形态观察 64
实验八 微生物染色技术 67
第四章?微生物的培养、分离及生长?/?74
实验九 培养基的配制和高压蒸汽灭菌 74
实验十 微生物的接种分离和纯培养 79
实验十一 亨盖特法厌氧培养基的制备 82
实验十二 厌氧微生物的分离培养 86
实验十三 噬菌体的分离纯化和效价测定 90
实验十四 微生物的计数—血细胞计数法 92
实验十五 微生物的计数—平板活菌计数法 95
实验十六 比浊法测定细菌生长曲线 97
实验十七 干重和湿重法测定微生物的生长量 100
第五章?微生物遗传学技术?/?102
实验十八 微生物的诱变和突变株的筛选 102
实验十九 营养缺陷型突变株的选育 105
实验二十 菌种保藏技术 109
第六章?分子生物学技术?/?117
一、目的基因的获得 117
二、载体系统的选择 117
三、目的基因与载体的重组 117
四、重组载体引入受体细胞 118
五、重组受体细胞的筛选和鉴定 118
六、目的基因在受体细胞内的表达 118
实验二十一 细菌总DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳 118
实验二十二 基本PCR技术扩增DNA片段 121
实验二十三 碱裂解法和试剂盒法提取质粒DNA 123
实验二十四 DNA分子的限制性核酸内切酶消化、片段纯化、连接 127
实验二十五 感受态细胞的制备 130
实验二十六 重组DNA转化宿主细胞 131
实验二十七 CRISPR/Cas9技术敲除大肠杆菌lacZ基因 133
第七章?微生物检测与鉴定?/?137
实验二十八 微生物的营养及生理生化反应 137
实验二十九 应用API-20E细菌鉴定系统鉴定肠杆菌科和部分其他革兰氏阴性杆菌 141
实验三十 以细菌16S rRNA序列和真菌ITS序列为基础的菌种鉴定 145
第八章?微生物技术的应用?/?149
实验三十一 土壤中纤维素分解菌的分离 149
实验三十二 食品样品中菌落总数的测定 157
实验三十三 食品样品中大肠菌群MPN值的测定 159
实验三十四 原生质体的制备 164
实验三十五 原生质体的融合 166
实验三十六?碱性蛋白酶产生菌的分离鉴定及酶活性测定 168
附录?/?172
附录Ⅰ 常用染色液的配制 172
附录Ⅱ 常用培养基配方 173
附录Ⅲ 常用缓冲液的配制 175
参考文献?/?178
数字资源:典型实验视频操作?/?179