植物发育生物学常用实验技术（第2版）_王东辉编著_9787301371350

《植物发育生物学常用实验技术》自第一版问世以来，为广大科研工作者提供了宝贵的实验指导。第二版教材在继承第一版精华的基础上，进行了全面的修订和扩展，以适应新时代科研的需求。一、结构框架的扩展与细化：第一版教材主要围绕植物形态观察、分子生物学检测、互作检测技术和转基因与突变体检测等方面展开，内容相对集中。而第二版教材在保持原有结构的基础上，进行了更为细致的划分和扩展。新增了植物组织培养技术、蛋白质分析技术、显微镜技术在植物发育生物学中的应用、基因编辑技术、植物生理学实验等多个章节，使内容更加丰富和全面。此外，第二版教材还增加了实验设计与数据分析、实验安全与伦理等章节，为读者提供了更为完整的实验指导。二、实验技术的更新与完善：第二版教材在实验技术方面进行了大量的更新和完善。例如，在基因检测及表达分析技术一章中，新增了RNA的碳蜡原位杂交实验、Northern杂交实验等内容，使基因表达分析技术更加全面和准确。在蛋白质分析技术一章中，新增了体外磷酸化实验、体外去泛素化实验等内容，使蛋白质分析技术更加深入和细致。此外，第二版教材还对一些原有的实验技术进行了修订和完善，使其更加贴近现代科研的需求。三、实验技术的深入与拓展：第二版教材不仅更新了实验技术，还深入拓展了实验技术的应用范围。例如，在显微镜技术在植物发育生物学中的应用一章中，详细介绍了光学显微镜、扫描电子显微镜、荧光显微镜和共聚焦显微镜等多种显微镜技术及其在植物发育生物学中的应用，为读者提供了丰富的实验手段和工具。在基因编辑技术一章中，介绍了CRISPR基因编辑技术及其在植物转基因实验中的应用，为读者提供了前沿的科技信息和实验指导。四、实验设计与数据分析的强调：第二版教材新增了实验设计与数据分析一章，强调了实验设计在科学研究中的重要性。本章介绍了实验设计的基本原则、数据分析与解读以及实验结果的呈现与讨论等内容，帮助读者更好地进行实验设计和数据分析，提高科研效率和质量。五、实验安全与伦理的关注：第二版教材还新增了实验安全与伦理一章，关注了实验室安全规范和废弃物处理与环境保护等问题。本章强调了实验室安全的重要性，介绍了废弃物处理的方法和环境保护的措施，同时也关注了科研诚信和伦理问题，引导读者树立正确的科研态度和价值观。

第一章引言 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 1-1 植物发育生物学简介 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 1-2 植物发育生物学的研究热点及未来趋势 … … … … … … … … … … … … … … … 7 1-3 实验技术在植物发育生物学中的重要性 … … … … … … … … … … … … … … 12 第二章植物培养技术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 16 2-1 烟草、拟南芥、水稻等模式植物的种植方法 … … … … … … … … … … … … 16 2-2 水稻愈伤组织的诱导、分化及再生 … … … … … … … … … … … … … … … … 19 第三章植物组织或器官显微观察常用技术 … … … … … … … … … … … … … … … … 29 3-1 植物材料徒手切片制作及染色 … … … … … … … … … … … … … … … … … … 29 3-2 植物组织石蜡切片制作与显微观察 … … … … … … … … … … … … … … … … 31 3-3 植物材料半薄切片制作与显微观察 … … … … … … … … … … … … … … … … 37 第四章显微镜技术在植物发育生物学中的应用 … … … … … … … … … … … … … … 43 4-1 光学显微镜的基本原理和实验操作 … … … … … … … … … … … … … … … … 43 4-2 扫描电子显微镜样品制备及观察 … … … … … … … … … … … … … … … … … 47 4-3 透射电子显微镜的基本原理和技术 … … … … … … … … … … … … … … … … 56 4-4 荧光显微镜的实验操作 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 65 4-5 共聚焦显微镜技术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 67 第五章基因检测及表达分析技术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 72 5-1 CTAB 法提取植物总 DNA … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 73 5-2 离心柱法提取植物总 DNA … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 76 5-3 植物总 RNA 的提取及逆转录 cDNA 的合成 … … … … … … … … … … … … 78 5-4 RT-qPCR 基因表达分析技术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 82 5-5 mRNA 的切片原位杂交实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 88 5-6 植物 mRNA 的整体原位杂交实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … 98 5-7 mRNA 的碳蜡原位杂交实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … … 102 5-8 Southern 杂交实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 108 5-9 Northern 杂交实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 115 第六章蛋白质分析技术 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 122 6-1 蛋白质印迹法( Western blotting)检测植物目的蛋白表达 … … … … … … 122 6-2 石蜡切片的蛋白质免疫定位… … … … … … … … … … … … … … … … … … … 129 6-3 徒手切片的蛋白质免疫定位… … … … … … … … … … … … … … … … … … … 134 6-4 烟草瞬时转化检测蛋白质亚细胞定位… … … … … … … … … … … … … … … 138 6-5 拟南芥原生质体的制备及转化检测蛋白质亚细胞定位… … … … … … … … 142 6-6 水稻原生质体的制备与瞬时转化实验… … … … … … … … … … … … … … … 147 6-7 体外磷酸化实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 152 6-8 体外去泛素化实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 158 第七章蛋白质-蛋白质、蛋白质-基因相互作用的检测技术 … … … … … … … … 165 7-1 酵母单杂交实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 165 7-2 核蛋白的酵母双杂交实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 169 7-3 ChIP … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 175 7-4 电泳迁移率变动分析实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 181 7-5 BiFC 检测蛋白质相互作用 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 189 7-6 CoIP 检测蛋白质相互作用 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 197 7-7 GST pull-down 技术分析植物蛋白质相互作用 … … … … … … … … … … … 206 第八章基因编辑技术在植物发育生物学中的应用 … … … … … … … … … … … … 215 8-1 水稻 T-DNA 插入突变体基因型的鉴定 … … … … … … … … … … … … … … 215 8-2 TAIL-PCR 技术分析水稻插入突变体侧翼序列 … … … … … … … … … … … 224 8-3 基因枪介导转化洋葱表皮瞬时表达实验… … … … … … … … … … … … … … 232 8-4 水稻 CRISPR 基因编辑植物的创制 … … … … … … … … … … … … … … … … 236 8-5 拟南芥转基因实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 248 第九章植物生理学实验 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 253 9-1 植物激素整体免疫定位实验… … … … … … … … … … … … … … … … … … … 253 9-2 植物激素石蜡切片免疫定位实验… … … … … … … … … … … … … … … … … 258 9-3 DCFH-DA 染色法检测活性氧 … … … … … … … … … … … … … … … … … … 264 9-4 流式细胞仪检测活性氧… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 267 9-5 植物组织中细胞凋亡的 TUNEL 检测 … … … … … … … … … … … … … … … 271 9-6 SOD 活性检测 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 276 9-7 外源 GA3对水稻半矮化突变体株高影响的研究 … … … … … … … … … … 277 第十章植物发育生物学的其他常用实验技术 … … … … … … … … … … … … … … 283 10-1 植物发育研究中常用的染色方法 … … … … … … … … … … … … … … … … 283 10-2 植物花粉的育性检测 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 289 10-3 小孢子母细胞减数分裂时期染色体压片观察 … … … … … … … … … … … 294 10-4 水稻杂交授粉检测雌雄蕊育性 … … … … … … … … … … … … … … … … … 297 第十一章实验安全与伦理 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 301 11-1 实验室安全规范 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 301 11-2 废弃物处理与环境保护 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 305 11-3 伦理问题与科研诚信 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 308

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