本书是作者长期从事银杏资源收集、分类评价及开发利用等方面研究的成果。银杏雌雄异株，是我国古老的孑遗树种。相比于银杏雄株，雌株因核用生产所需而被研究得较为深入，但我国银杏雄株资源丰富，研究雄株资源的多样性，评价其各类资源的孢粉学特性和药用成分黄酮含量的水平，对于雄株优良株系的选育、花粉和叶片资源的综合开发利用具有重要的意义。
《银杏雄株资源多样性分析与评价》主要通过选用江苏扬州、泰州、徐州等银杏主要产区的雄株为试材，采用孢粉学和ISSR分子标记等技术研究银杏雄株资源的多样性，综合评价了银杏雄株不同类型的聚类关系；利用高效液相色谱（HPLC）技术检测雄株叶片和花粉中槲皮素、山奈黄素和异鼠李素三种黄酮苷元和总黄酮含量，并根据设定的黄酮苷元和总黄酮含量的选择阈值筛选出了叶用和花粉用雄株优良株系；运用紫外分光光度法分析了银杏叶片中银杏酸的含量，为筛选出低酚酸叶用银杏雄株资源提供了一定的理论依据和物质基础。
李卫星，男，1970年4月出生，江苏沛县人，植物学博士，副教授，硕士生导师。1994年园艺专业本科毕业留校工作，后在职学习获得硕士学位、博士学位。2015年12月至2017年12月，参加中组部、团中央第16、17批博士服务团赴西藏挂职。长期从事经济林、观赏植物等的资源评价、开发、推广等方面的研究，主持中央林业科技推广、国家农业综合开发科技推广、江苏省林业三新工程项目、江苏省农业地方标准编制等项目10余项，参与国家自然科学基金、江苏省自然科学基金项目多项。尤其在银杏新品种选育、资源的研究利用和樱花的综合利用方面取得了一定的成果，撰写论文20余篇，先后在《Horticulture Reserch 》、《BMC Genomics》、《Tree Genetics & Genomes》、《Trees》、《中国农业科学》、《扬州大学学报（农业与生命科学版）》等期刊发表；主持编制《银杏容器扦插育苗技术规程（DB32/T2353-2013）》、《银杏大树移栽技术规程（DB32/T2352-2013）》等江苏省地方标准6项。参与的项目曾获教育部科技进步一等奖、全国商业科技进步奖一等奖。
第一章 文献综述 1
1.银杏植株的性别鉴别研究 1
1.1形态学标记 1
1.2细胞学标记 2
1.3生物化学标记 2
1.4分子标记 2
2.银杏花粉的研究 3
2.1雄花的特点 3
2.2花粉的发育 4
2.3花粉的形态特征 5
2.4花粉的结构特征 5
2.5银杏花粉的应用研究 6
2.5.1有效成分的概况 6
2.5.2有效成分的提取与分析 7
2.5.3花粉的开发 8
3.银杏种质资源遗传多样性的分子标记研究 8
3.1种质资源的遗传图谱构建 9
3.2 RAPD分子标记 9
3.3 RFLP分子标记 10
3.4 AFLP分子标记 10
3.5 ISSR分子标记 11
4.银杏有效成分代谢与变化研究 12
4.1银杏的植物学与经济学性状 12
4.2有效成分的代谢特点 13
4.2.1有效成分的种类 13
4.2.2有效成分的代谢途径 15
4.3银杏叶片黄酮含量的变化规律 16
4.4 银杏雄株有效成分的提取、分离和检测研究 17
4.4.1叶片黄酮类化合物的提取 17
4.4.2叶片黄酮类化合物含量的测定 19
4.4.3 银杏酸的提取、分离、检测 20
4.5有效成分的开发利用研究 21
4.5.1黄酮类化合物的药用功效 21
4.5.2 银杏酸的生理活性作用 24
5.本研究的意义和主要内容 26
5.1本研究的重要意义 26
5.2本研究的主要内容 27
第二章 银杏雄株资源多样性的孢粉学研究 28
1. 材料与方法 30
1.1试验材料 30
1.2花粉粒形态特征与结构的观测 30
1.3银杏雄株花粉形态特征的聚类分析 31
1.4数据分析方法 31
2 结果与分析 31
2.1花粉粒的形态大小观测 31
2.2花粉壁雕纹特征与差异 31
2.3 花粉粒形态特征的聚类分析 32
2.4 花粉壁结构的TEM观测及其雄株类型间的差异 34
3 讨论 37
3.1银杏雄株多样性孢粉学研究的可行性 37
3.2花粉粒的外观形态结构特征 38
3.3 花粉外壁表面纹饰的多样性 38
3.4 花粉形态结构的系统聚类分析 39
图 版 40
第三章 银杏雄株资源多样性的ISSR标记分析 48
1.材料与方法 50
1.1 试验材料 50
1.2 主要仪器和设备 50
1.3 主要药品和试剂 50
1.4 银杏雄株叶片基因组DNA的提取与纯化 50
1.5 银杏基因组DNA质量的检测 51
1.6 PCR扩增 51
1.7 ISSR引物的筛选 52
1.8 统计分析 53
2. 结果分析 53
2.1叶片基因组DNA提取与质量检测 53
2.2 ISSR-PCR反应体系的优化与建立 55
2.2.1 正交设计的直观分析 55
2.2.2 试验结果的统计分析 55
2.2.3 退火温度的确定 58
2.3 银杏雄株ISSR标记的引物筛选 59
2.4 银杏雄株ISSR标记的聚类分析 61
2.5 银杏雄株遗传多样性的比较分析 62
2.6 银杏雄株群体遗传多样性的比较分析 62
2.7 银杏雄株群体间的遗传分化分析及聚类分析 63
3.讨论 65
3.1 ISSR-PCR反应条件对研究结果的影响 65
3.2 银杏雄株ISSR标记的聚类分析 66
3.3 银杏雄株种质资源的遗传多样性分析 66
3.4 三个银杏雄株群体的遗传分化分析 67
附录 68
第四章 银杏雄株叶片黄酮类化合物含量的分析 71
1. 材料与方法 73
1.1 试验材料 73
1.2仪器与试剂 73
1.2.1仪器 73
1.2.2试剂 74
1.3黄酮类化合物的提取 74
1.3.1提取体系的优化和建立 74
1.3.2黄酮类化合物的提取 74
1.4黄酮类化合物的HPLC检测 75
1.5雄株相关植物学性状的测定 76
2结果与分析 76
2.1黄酮类化合物提取最佳体系的筛选 76
2.1.1 水溶液黄酮类化合物的正交设计结果 76
2.1.2乙醇溶液提取黄酮类化合物的正交设计结果 76
2.1.3 不同溶剂提取的结果比较 78
2.2银杏雄株叶片黄酮含量分析 79
2.2.1不同采叶期黄酮类化合物的含量 79
2.2.2不同株系叶片黄酮苷元含量的比较 81
2.2.3不同株系总黄酮含量的比较 82
2.2.4优良雄株株系的选择 83
2.3银杏雄株叶片黄酮类化合物含量的相关性状分析 83
3讨论 84
3.1 开展银杏雄性株系叶片指纹图谱研究的意义 84
3.2叶片黄酮苷元及总黄酮含量的变化规律 84
3.3叶片总黄酮含量优良株系的选择 85
附：银杏叶片高含量黄酮类化合物优选雄株的HPLC色谱图： 86
第五章 银杏花粉黄酮类化合物含量的分析 90
1. 材料与方法 91
1.1 试验材料 91
1.2仪器与试剂 91
1.2.1仪器 91
1.2.2试剂 92
1.3花粉中黄酮类化合物的提取 92
1.3.1花粉的破壁 92
1.3.2黄酮类化合物的提取 92
1.4黄酮类化合物的HPLC检测 92
1.5雄花形态指标、花粉性状指标的测定 92
2. 结果与分析 93
2.1 黄酮含量的分析 93
2.1.1 不同株系黄酮苷元含量的比较 93
2.1.2 不同株系总黄酮含量的比较 96
2.1.3 优良雄株株系的选择 96
2.2 叶片和花粉中黄酮苷元及总黄酮含量的比较 97
2.3银杏雄株花粉黄酮类化合物含量的相关性状分析 97
3讨论 98
3.1 开展银杏花粉黄酮苷元指纹图谱研究的意义 98
3.2 花粉的破壁方法 98
3.3花粉中主要黄酮苷元的含量 99
附：银杏花粉高含量黄酮类化合物部分优选雄株的HPLC色谱图： 100
第六章 银杏雄株叶片银杏酸含量的分析 104
1.材料与方法 106
1.1供试材料 106
1.2仪器与试剂 106
1.2.1仪器 106
1.2.2试剂 106
1.3银杏雄株银杏酸类化合物的UV检测方法 106
1.3.1银杏酸的提取分离 106
1.3.2银杏酸类化合物的UV检测 107
2结果与分析 107
2.1不同采叶期叶片中银杏酸的含量 107
2.2银杏雄株不同类枝条着生的叶片中酚酸类成分含量的差异 107
2.3银杏酸含量较低的雄株优选 107
3讨论 109
3.1叶片银杏酸含量的检测分析方法 109
3.2叶片银杏酸的含量变化研究 111
第七章 本研究的主要结论与创新点 112
1. 本研究的主要结论 112
2. 本研究的创新点 114
3. 本研究的下一步打算： 114
参考文献 115
致 谢 133
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